第六章+样品采集技术课件.ppt

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1、第六章第六章样品采集技术样品采集技术Slide#2讨论主题:4SCAN采集方式的适用性4各种数据采集参数对数据的影响Scan 采集原理Slide#3125010015020025030011109876Time minutesMass daltons质谱数据是三维的Slide#4Time-Abundance4.765.775.886.436.807.074.505.005.506.006.507.007.50 0 2000000 4000000 6000000 8000000 1e+007 1.2e+007TIC:DRUGDEMO.D总离子色谱Slide#5M/ZAbundance821661

2、8230350100150200250 1000000Scan 32(5.281 min):ALKDEMO.DM/ZAbundance8216618230350100150200250 1000000Scan 33(5.289 min):ALKDEMO.DM/Z Abundance8216618230350100150200250 1000000Scan 34(5.297 min):ALKDEMO.DM/ZAbundance8216618230350100150200250 1000000Scan 35(5.305 min):ALKDEMO.DTimeAbundance5.255.265.27

3、5.285.295.305.315.325.33 2000000 4000000 6000000 8000000TIC:ALKDEMO.D32333435313630总离子色谱Slide#6MASSTIMEMS 采集参数质量范围e.g.35-350A/D se.g.N=2or 4 samplesper 0.1 amuScan high low,0.1 amu stepsSignal averaging with 2 determinations per 0.1 amu data pointMASSTIME质量峰检测Slide#7影响扫描时间的因素:平均每 0.1 amu 增加 数据点的数目(s

4、ampling rate)扫描质量范围 离子检测的真实数目(scan threshold)每个色谱峰通过5-10次扫描可以很好地 定性定性!每个色谱峰通过10-20次扫描可以很好地 定量定量!MASSTIME程序时间回扫时间扫描时间扫描循环时间数字式扫描过程Slide#81E22E23E24E25E26E27E28E29E21E31E3ABUNDANCE150.0151.0152.0153.0154.0155.0M/Z1.1E3阈值321451234532145STORES:154.10,1137用五个邻近的数据点平滑确定中心质量(质量峰最大).质量中心的水平应超过质量阈值数据文件同时储存质量

5、和丰度质量峰检测(续)Slide#9阈值过高82182M/Z相对强度M/Z相对强度82303182阈值设置适当阈值Slide#104MS 需考虑的事项扫描速度/循环时间4GC 需考虑的事项峰宽4Data 需考虑的事项信号:噪声比率高斯峰形峰倾斜阈值Slide#11讨论主题:选择离子检测（SIM）与扫描的区别SIM 采集参数如何影响数据SIM 方式如何进行数据采集选择离子检测的原则Slide#12SIMSIM是什么是什么?只监视所选择信息的质荷比它如何做它如何做?控制质量分析器，仅仅对感兴趣的质量进行分析为什么做为什么做?提高灵敏度改善峰形改善精确度应用应用痕量分析复杂基质常规定量选择离子检测S

6、lide#13SIM 数据采集DwelltimeSIMmass 1SIMmass 2SIM 循环时间四极杆电压(amu)TIMESIMmass 3空中时间扫描数据采集扫描时间扫描循环时间空中时间四极杆电压(amu)TIMESIM 与SCAN比较Slide#144选择:离子/组数目每个离子驻留时间 以便获得良好的数据采集所需的循环/峰数目4目标:每个峰通过 15-25 次循环4每个离子驻留时间相同4运用时间规划(SIM Groups)使 采集/循环离子数目最少设置 SIM 采集Slide#15该 SIM质谱图是 9-羧基 THC的离子以 0.1 amu 增加量.选择最大丰度的质量数做SIM采集动

7、态质量校正9-CarboxyTHC TMS DerivativeMass to charge ratio in 0.1 amu increments020406080100120.7.8.9.0.1.2.3.4.5.7.8.9.0.1.2.3.4.5.7.8.9.0.1.2.3.4.5.7.8.9.0.1.2.3.4.573.0488.3473.3371.2Normalized Abundance371.0473.0488.0动态质量校正Slide#16在左图的三种可能性中选择最大丰度质量,不会导致 来源于调谐与调谐之间不正确比率的错误负峰选择精确质量和整数质量对照Slide#17如果自动调谐

8、质量轴为-0.1amu 离子比率将如何？左图为精确质量，右图为整数质量 二者化合物相同但测定结果不同9-羧基 THC TMS 衍生物峰比率Slide#184可以监视 30 离子/组,50 组/采集4使用最小数目的 离子/组 以获得最大灵敏度和精度4选择最有特征的离子高质量丰度化合物特有的4可以选择化合物的特征离子以达到分类目的选择 SIM 离子Slide#19PEAK#1:质谱图质量数丰度表Quant Ion:Qualifier Ion:Qualifier Ion:20 30 40 50 60 70 80 90 100 110120 130 140 150 160050000100000150

9、000200000250000300000350000400000450000500000550000600000650000700000750000m/z-Abundance28394451 6375768998102115125128139151154联苯%abund.m/z%abund.m/z50.12127.1251.13128.2363.13139.1264.13150.2274.02151.2875.12152.12676.112153.14077.15154.1100115.14155.113126.13PEAK#2:质谱图质量数丰度表20406080100 120 140 16

10、0 180 200050000100000150000200000250000300000350000400000450000m/z-Abundance2628395163768794101113126136149152162177188191氯联苯m/z%abund.m/z%abund.50.12149.1351.12150.1563.15151.21374.13152.14475.15153.11976.114154.1294.14188.2100101.12189.113126.13190.233127.13191.14Quant Ion:Qualifier Ion:Qualifier

11、Ion:选择 离子 SIM-Course ProblemSlide#20RF 电压DC 电压扫描线选择153151152高-维持质量峰宽 为 0.5 amu低(默认值)-质量峰宽增大到 0.9 amu选择“LOW”可增加灵敏度低分辨方式不适合于质量差别低分辨方式不适合于质量差别 3 3 amuamu的化合物测定的化合物测定(如：如：同位素标记内标同位素标记内标)低或高质量分辨Slide#21本章将学到如何输入 GC 参数如何输入 MS(scan)参数如何输入 MS(SIM)如何输入如何设置系统监控数据采集设置Slide#22Slide#23 method 是为仪器和计算机设定的采集和处理数据的

12、一个完整指示数据采集采集方式调谐文件MS 质谱应用参数GC 质谱应用参数 进样口参数Methods Methods 在在 HPCHEMnMethodsHPCHEMnMethods 子目录下子目录下 由由 “.m m”扩展名识别扩展名识别.数据文件在数据文件在 HPCHEMnDATA HPCHEMnDATA 子目录下子目录下 由由 “.d d”扩展名识别扩展名识别.n n represents instrument numberrepresents instrument number什么是方法?Slide#24所有仪器控制由这一窗口进行当前方法显示于栏目中Views-仪器控制Slide#25输入

13、所有流量和压力参数(选用恒流方式、MSD及Vacuum色谱柱Slide#26安装柱子点击Slide#27点击Slide#28Slide#29输入柱子编号，点击OKSlide#30按Add 出现这一目录“Install”安装校正 所安装的柱子更换柱子Slide#31从目录中选择柱子在目录中增加柱子从目录中删除柱子更换柱子(添加新柱子于目录中)Slide#32选择柱子以安装从目录中删除柱子更换柱子(“install”)Slide#33使用其他厂家柱子Slide#34填写相关信息，点击OKSlide#35校正柱长步骤1首先用1微升空气进样，记录其保留时间。点击 change/calibrateSli

14、de#36步骤2Slide#37输入空气峰的真实保留时间步骤3Slide#38步骤4Slide#39步骤5Slide#40选择进样方式Slide#41选择进样源(GC or other)选择进样方式(手动,ALS,或阀)如果手动，需选择进样口如果选用MS采集样品，选择 Use MS.如果只用GC，则不选此项进样口和注射器信息Slide#42选择方法的某部分进行编辑 方法/编辑完整方法编辑方法Slide#43填入关于方法的说明选择acquisitions 和 analysis方法信息Slide#44设置进样量和注射器清洗程序按键 Configure.设置注射器大小按键 More.设置注射速度注射

15、器控制Slide#45黏度：最后一次泵起至进样的时间有效值0-7样品深度：0.00表示针尖与标准瓶底距离3.6mm有效值-230.0进样前注射器在进样口停留时间,有效值0.00-1.00进样后注射器在进样口停留时间,有效值0.00-1.00进针速度Slide#46首先配置阀(如果使用)使用 RunTime 对话框，确定运行过程中阀事件的时间表阀控制Slide#47阀在 OPEN 位置超量液体从分流口排出FSPSSPR流量限制器比例阀 1流量 控制回路阱流量传感器隔垫螺母 压力传感器隔垫吹扫 调整柱头压控制回路隔垫吹扫出口分流出口比例 阀 2吹扫阀(开)分流进样方式Slide#48阀处于 CLO

16、SED 位置除隔垫吹扫外，全部流量进入柱子FSPSSPR流量限制器比例阀 1阱流量传感器隔垫螺母压力传感器隔垫吹扫调整隔垫吹扫出口分流出口比例 阀 2Purge 阀(关)进样口压力控制回路不分流进样方式Slide#49选择 Split输入全部设定值进样口-分流进样Slide#50选择 Splitless输入全部设定值进样口-不分流进样Slide#51选择 Pulsed Splitless输入全部设定值进样口-脉冲不分流进样Slide#52选择 Pulsed Split输入全部设定值进样口-脉冲分流进样Slide#53柱流量和压力按时间编程程序变流进样Slide#54输入炉温设定值炉温Slide#55输入 GC 检测器温度设定值(如果有GC检测器)检测器Slide#56保存 GC 检测器数据(如果有GC检测器)监控温度监视流量或压力信号Slide#57输入辅助部件（MS接口）温度输入辅助部件压力辅助部件Slide#58运行期间可自动运行25个时间表运行时间表Slide#59为方法定义压力单位锁住 HP6890 键盘GC 检测器柱补偿(如果有GC检测器)选项Slide#60从仪器控制面板监